Contact

E-mail: citometria@bio.puc.cl

Phone: +56 2 23541924

Work hours: Monday to Friday 10:00 to 18:00 hours.

Flow cytometry service

The flow cytometry services consist in the use of any of the three flow cytometers, FACSCalibur, FACSCantoII or LSR Fortessa X20, to analyze different samples through flow cytometry techniques accompanied by the service manager. The service is aimed to any researcher who needs analyze any sample by this technique. Is important to mention, that different type of samples could be passed in the flow cytometers, for examples, bacteria, human blood cells, murine cells, vegetal cells, different types of cells lines and beads of different size.

Cell sorting service

This service allows the separation of the different cellular population by its detectable characteristics by flow cytometry. This characteristic let isolate cellular population through its morphological characteristics and also by specific expression of components measure by fluorescence by antibodies or any dye detectable in the cytometer. The most typical example is the separation of transfected cells that express a fluorescent reporter (as GFP) and with this technique separate only the transfected cells. FACSAria II cell sorter is able to separate even 4 populations at the same time and this samples can be used for different purpose as cell culture, protein extraction, RNA and DNA extraction among others.

Typical Cuestions

Only can be used samples stained with fluorescent antibodies?

The flow cytometry allows to measure any fluorescent molecule, this means, that not only antibodies can be used, also can be measured dyes or different components that can be excited by the laser and be detected by the cytometer.

 

Is possible to measure fluorescent proteins, as GFP?

Indeed, the flow cytometer are capable to measure different fluorescents proteins, is due to the protein characteristics that can be excited by the laser wavelength and can emitted to another wavelength that can be detected by the cytometer. Thus, depends of the protein excitation/emission characteristic to be detected by the flow cytometer.

microscope

Equipment

Flow cytometry could be defined as the measure of cells in fluidics, that means it could be possible to distinguish a cell in constant fluidics. The Flow cytometer is an instrument that allows measure three components in one simple cell: 1) the relative size 2) the internal complexity and 3) the expression of proteins of interest through antibodies coupled to fluorophores and another fluorescent proteins . The equipment is composed by Optical system, relative to the use of laser at different wavelengths which excites the fluorophores in the sample and a collection of different detectors. Fludics, this component is one of the more important in flow cytometry, because is necessary to the sample being in a constant fluidic allowing the alignment of sample components and each component cross through the laser individually. The last component is the electronic component, which is capable to transform the analog signal receive from the sample excitation to a digital form to be visualized and processed in a computer. In our service we count with three flow cytometers and one cell sorter.

FACSCalibur

FACSCalibur: One of the most basics instruments that we have in the unity, this equipment is capable to analyze 4 colors (FL-1, FL-2, FL-3 y FL4) simultaneasly additionally to side scatter (SSC) and forward scatter (FSC). The configuration of this equipment allows the measurement of each component in height (H). This cytometer has the next filters: FL1 530/30 (FITC), Fl2 585/42 (PE), FL3 670 (PercP) excited by blue laser (488nm) and FL4 661/16 excited by red laser (635nm). The resolution of this cytometer is enough to separate clearly monocytes, lymphocytes, granulocytes and detect bacteria.

FACSCanto II: Is the most used cytometer inside of the unite, this equipment is capable to analyze 6 different colors simultaneously additionally to side scatter (SSC) and forward scatter (FSC). This cytometer has the configuration to capture all measures in the three components, height (H), area (A) and width (W), which simplify the singlet cell separation. This cytometer has four detectors for the blue laser: 530/30 (FITC), 585/42 (PE), 670 (PercP, PercP-Cy5.5), 780/60 (Pecy7) and 2 detectors for the red laser (633nm) 660/20 (APC) y 780/60 (APC Cy7). The resolution is FSC 1.0mm and SSC 0.5mm.

Fortessa X20

LSRFortessa X20: The newest cytometer that we have in the platform. This cytometer is capable to analyze 18 colors simultaneously, additionally to side scatter (SSC) and forward scatter (FSC). The configuration of this equipment allows to make measurement of the all parameter in the three principal components: height (H), area (A) and width (W) which make simple the separation of singlet cells. This cytometer has: 6 detectors for the blue laser (488nm), 525/50 (FITC), 575/25 (PE), 610/20 (Pe-CF594), 670/30 (PeCy5), 695/40 (PercP, PercP-Cy5.5) y 780/60 (Pecy7). Four detectors for the red laser (640nm) 670/30 (APC), 685/35 (APC Alexa 680), 730/45 (APC Alexa 700) y 780/60 (APC Cy7). Six detectors for the violet laser (405nm) 450/50 (BV421), 525/50 (BV510), 610/20 (BV605), 670/30 (BV650), 710/50 (BV711) y 780/60 (BV786) and 2 detectors for the ultraviolet laser (355nm) 379/28 (BUV395) y 740/35 (BUV737). The resolution of SSC is 0.5mm.

FACSAria II: This cytometer besides of have all the capacity of every cytometer has the capacity to separate specifics population of interest. This cell sorter has the capacity to separate 4 populations simultaneously. The cytometer configuration allows the measure of the height (H), Area (A) and width (W) component for each parameter. This cell sorter has 5 detectors for the blue laser (488nm), 530/30 (FITC), 585/42 (PE), 616/23 (Pe-CF594), 695/40 (PercP, PercP-Cy5.5) y 780/60 (Pecy7). Two detectors for the red laser (640nm) 660/20 y 780/60 (APC Cy7) and 2 detectors for near Ultraviolet laser (375nm) 450/40 (DAPI) y 530/30 (Pacific Orange). The resolution of the cytometer is FSC 0.5mm and SSC 0.5mm.

command

Who We Are

The Flow cytometry facility belongs to the Biological Sciences faculty of the Pontificia Universidad Católica de Chile and is located in 5th floor of 150 building. This facility is directed by Dr. Alexis Kalergis, who is a full professor on this University. The service stared in 2005 with the aim of helping to the different researchers to solve their scientific concerns from flow cytometry perspective.

Dr. Alexis M. Kalergis

Dr. Alexis M. Kalergis

Director

Biochemestry of Pontificia Universidad Católica de Chile and PhD in Microbiology and Immunology at the Albert Einstein College of Medicine in Nueva York–USA.

Later, he made two post-doctoral fellowship one in the Albert Einstein and the second in the Rockefeller University on New York, USA. Currently Dr. Kalerigs is full professor in the Biological Sciences faculty at the Pontificia Universidad Católica de Chile leading his own laboratory on Biomedical Molecular Immunology. Additionally, Dr. Kalergis is the director of the Millenium Institute in Immunology and Immunotherapy allowing him generates some collaboration inside of this Immunology. At this moment, Dr. Kalergis leading and the first phase I clinical trial of a vaccine against one of the more important pathogens in public health as is the Respiratory Syncytial Virus, which affect principally newborns and elderly population collapsing public health services worldwide in winter months.

Contact: akalergis@bio.puc.cl

Roberto S. Gómez

Roberto S. Gómez

Principal Manager

Biologist graduated of the Pontificia Universidad Católica de Chile and currently is cursing his PhD in the same University. Roberto, has been in charge of the flow cytometry unite since 2010 to the date. He has been trained by the previous manager, Dr Leandro Carreño, who taught him how to use and handle the FACSCalibur, FACSCantoII and FACSAria II flow cytometer. During 2013, he made an internship in France, where he learns the use of LSR flow cytometer. In 2014, he participates in the training of LSR FortessaX20 flow cytometer and FACSDIVA 8 software given by Beckton Dickinson.

Contact: citometria@bio.puc.cl, rsgomezj@gmail.com

Phone: +56 2 23541924

Research Gate Profile

Natalia Muñoz Durango

Natalia Muñoz Durango

Deputy Manager

Microbiology and Bioanalist at the Universidad de Antioquia, Colombia and master in Basic Biomedics Sciences at the same University. Currently Natalia is cursing her PhD in the Biological Sciences faculty at the Pontificia Universidad Católica de Chile. She has experience in flow cytometer management and flow cytometry analyzes. She made a few training courses: Training and attendance of II International congress of flow cytometry application, Becton Dickinson Bioscience (2006); Theoric-practice course in flow cytometry topics flow cytometry unite, Universidad de Antioquia in 2011; Training of BD FACSAria II(2014) and training in the management of BD LSRFortessa X-20 flow cytometer and software FACSDiva 8 for 18 colors flow cytometry(2014)

Contact: natydurango@gmail.com

Phone: +56 2 23541924

Research Gate Profile

 

Evelyn Jara Fernández

Evelyn Jara Fernández

Deputy Manager

Biochemist at the Universidad Austral de Chile in Valdivia and Dra. in Science with Cellular and Molecular Biology mention in the same university. Dra. Jara is currently Fondecyt Postdoctoral Researcher in the Laboratory of Molecular Immunology and Biomedical Microbial Pathogenicity. Dr. Jara has experience in flow cytometer and flow cytometry analyzes. Dra. Jara has done some courses, among which are:. 1) training in the use of FACSCanto II equipment and management software (Becton Dickinson Bioscience October 2008 . Valdivia Chile); 2) training in the management of BD LSRFortessa X-20 flow cytometer and software FACSDiva 8 (2014).

Contact: jaraevelyn@gmail.com

Phone: +56 2 23541924

 

Flow Cytometry

The Flow cytometry facility belongs to the Biological Sciences faculty of the Pontificia Universidad Católica de Chile and is located in 5th floor of 150 building.

The flow cytometry service of Biological Sciences faculty of Pontificia Universidad Católica de Chile rise from different laboratory needs inside on the university to analyze different samples through flow cytometry technique, which allows multiparametric analyzes in one big cellular population, being able to analyze different cells types to differences in protein expression on these cells. As sciences are going forward flow cytometry is going forward too, diversifying its uses and now not only you can measure elements in the cells when you have a specific antibody, now you can also use different fluorescents dyes to measure for example oxidative stress or cell proliferation. Furthermore, this service has the possibility to separate different cellular population by its specific characteristics determinate by the researcher, which allows the purification of cell population that express one or another protein or have any characteristic that can be measure by flow cytometry.

The service has three flow cytometers; FACSCalibur, in which is possible analyze 4 parameters simultaneously; FACSCantoII, in which is possible analyze 6 parameters simultaneously; LSR Fortessa X20, in which is possible analyze 16 parameters simultaneously. Additionally, we have a cell sorter FACSAria II, in which is possible to analyze 9 parameters and separate up to 4 populations simultaneously.

Contacto

E-mail: citometria@bio.puc.cl

Teléfono: +56 2 23541924

Horario: Lunes a viernes 10:00 a 18:00 horas

Servicio citometría de flujo

El servicio de citometría consiste en la posibilidad de utilizar cualquiera de los tres equipos, FACSCalibur, FACSCantoII o LSR Fortessa X20, para analizar diferentes tipos de muestras por medio de la técnica de citometría de flujo acompañado del encargado del servicio. El servicio está dirigido a cualquier investigador que necesite analizar muestras por medio de esta técnica. Cabe destacar que dentro de las posibles muestras se encuentran diferentes tipos de muestras provenientes de diversas fuentes. Dentro de los tipos de muestras que han sido analizados en estos citómetros, encontramos bacterias, células humas, células murinas, células vegetales y beads de diferentes tamaños.

Servicio cell sorting

El servicio de cell sorting permite separar diferentes poblaciones dependiendo de sus características detectadas por citometría de flujo. Esta gran característica permite aislar poblaciones celulares a través de sus características morfológicas y también a través del marcaje especifico de algún componente particular. El ejemplo más típico de separación es: separación de células transfectadas que expresan un reportero fluorescente (típicamente GFP) y así poder obtener solo las células transfectadas para realizar experimentos posteriormente. El equipo FACSAria II con el cual cuenta la unidad es capaz de separar hasta 4 poblaciones a la vez y estas muestras puede ser utilizadas para diferentes propósitos a posterior: cultivo celular, extracción de proteínas, extracción de material genético entre otros.

Preguntas Frecuentes

¿Solo se pueden medir muestras con anticuerpos fluorescentes?

La citometría de flujo permite la medición de cualquier molécula fluorescente, es decir, no solo se pueden hacer mediciones con anticuerpos fluorescentes, también se puede medir moléculas fluorescentes, sondas fluorescentes, diferentes colorantes o componentes fluorescentes. Todo depende de los láseres y detectores con los cuales cuenten los citómetros.

 

¿Se puede medir la expresión de proteínas fluorescentes, por ejemplo GFP?

En efecto, los equipos de citometría son capaces de medir diferentes proteínas fluorescentes, esto es debido a que estas proteínas son excitadas a cierta longitud de onda y emiten a otra longitud que es captada por los detectores de los citómetros. De esta forma, dependiendo de la longitud de onda a la cual se excita y emite la proteína esta puede ser detectada por el citómetro.

microscope

Equipamiento

La citometría de flujo se puede definir como la medición de células en un fluido, esto quiere decir que uno es capaz de caracterizar una célula en un fluido constante. Los citómetros de flujo son instrumentos que nos permiten a través de tres componentes medir diferentes parámetros en una célula, desde su tamaño relativo hasta su complejidad interna. Los componentes son: Óptica, la cual se refiere al uso de haces de luz (láseres) a diferentes longitudes de onda ópticas que excitan la muestra de interés y la muestra emite a otra longitud de onda que es captada por diferentes detectores para longitudes de onda específicos. Fluido, el fluido es uno de los componentes más importantes dentro de la citometría ya que es necesario que la muestra pase por un fluido el cual genera que los componentes de la muestra se alinean y así cada componente pueda ser excitado por los láseres de manera individual. Y el último componente es el eléctrico, el cual es capaz de captar la señal emitida por la excitación de la muestra y transformarla desde una señal análoga a digital y así poder ser procesada en un computador. En nuestro servicio de citometria contamos con tres citómetros de flujo y un cell sorter.

FACSCalibur

FACSCalibur: Uno de los equipos más básicos con los que cuenta la unidad, este equipo es capaz de analizar 4 colores (FL-1, FL-2, FL-3 y FL4) simultáneamente además del side scatter (SSC) y forward scatter (FSC). La configuración de este equipo solo permite realizar mediciones en el componente de altura (H). Los detectores que tiene este equipo son: FL1 530/30, FL2 585/42, FL3 670LP excitados por el láser azul (488nm) y FL4 661/16 excitados láser rojo (635nm). La resolución de este equipo es suficiente para separar linfocitos, monocitos y granulocitos y hasta detectar bacterias.

FACSCanto II: Es uno de los equipos más usados dentro de la unidad, este equipo es capaz de analizar hasta 6 colores simultáneamente, además del side scatter (SSC) y forward scatter (FSC). La configuración de este equipo permite realizar mediciones en el componente de altura (H), área (A) y tiempo de vuelo (W), los cuales son muy útiles para hacer la separación de células simples de células simples. Los detectores con los que cuenta este equipo son 4 para el láser azul (488nm), 530/30 (FITC), 585/42 (PE), 670 (PercP, PercP-Cy5.5), 780/60 (Pecy7) y 2 para el láser rojo (633nm) 660/20 (APC) y 780/60 (APC Cy7). La resolución de FSC 1.0mm y SSC 0.5mm.

Fortessa X20

LSRFortessa X20: Es el último equipo que llegó a la unidad, este equipo es capaz de analizar hasta 18 colores simultáneamente, además del side scatter (SSC) y forward scatter (FSC). La configuración de este equipo permite realizar mediciones en el componente de altura (H), área (A) y tiempo de vuelo (W), los cuales son muy útiles para hacer la separación de células simples de células simples. Los detectores con los que cuenta este equipo son 6 para el láser azul (488nm), 525/50 (FITC), 575/25 (PE), 610/20 (Pe-CF594), 670/30 (PeCy5), 695/40 (PercP, PercP-Cy5.5) y 780/60 (Pecy7). Cuatro detectores para el láser rojo (640nm) 670/30 (APC), 685/35 (APC Alexa 680), 730/45 (APC Alexa 700) y 780/60 (APC Cy7). Seis detectores para el láser violeta (405nm) 450/50 (BV421), 525/50 (BV510), 610/20 (BV605), 670/30 (BV650), 710/50 (BV711) y 780/60 (BV786). Y 2 detectores para el láser ultravioleta (355nm) 379/28 (BUV395) y 740/35 (BUV737). La resolución de SSC es de 0.5mm.

FACSAria II: Este equipo en particular además de poder analizar las poblaciones celulares por sus características es capaz de separarlas. Este equipo cuenta con la capacidad de separar hasta cuatro poblaciones simultáneamente. La configuración de este equipo permite realizar mediciones en el componente de altura (H), área (A) y tiempo de vuelo (W), los cuales son muy útiles para hacer la separación de células simples de células simples. Los detectores con los que cuenta este equipo son 5 para el láser azul (488nm), 530/30 (FITC), 585/42 (PE), 616/23 (Pe-CF594), 695/40 (PercP, PercP-Cy5.5) y 780/60 (Pecy7). Dos detectores para el láser rojo (640nm) 660/20 y 780/60 (APC Cy7). Y 2 detectores para el láser cercano al ultravioleta (375nm) 450/40 (DAPI) y 530/30 (Pacific Orange). La resolución de FSC 0.5mm y SSC 0.5mm.

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Quiénes Somos

El servicio de citometría de flujo se encuentra dentro de la Facultad de Ciencias Biológicas de la Pontificia Universidad Católica de Chile y está dirigido por el profesor Titular de la Universidad el Dr. Alexis Kalergis. Este servicio existe desde el año 2005 y está enfocado a poder ayudar a los diferentes investigadores a solucionar sus inquietudes a través de la técnica de citometría de flujo.

Dr. Alexis M. Kalergis

Dr. Alexis M. Kalergis

Director

Bioquímico de la Pontificia Universidad Católica de Chile y Doctor en Microbiología e Inmunología del Albert Einstein College of Medicine en Nueva York–USA. Posteriormente realizó dos post-doctorados, uno en el Albert Einstein y otro en The Rockefeller University, Nueva York-USA. El Dr. Kalergis actualmente es profesor titular de la facultad de Ciencias Biológicas en la Pontificia Universidad Católica de Chile y director del Instituto Milenio de Inmunología e Inmunoterapia. El profesor Kalergis ha destacado recibiendo varios premios y distinciones desde sus comienzos en el 2004 en la Univerisdad. El Dr. Kalergis ha trabajado siempre relacionado con el área de inmunología desarrollando múltiples colaboraciones en diferentes áreas de esta ciencia. En estos momentos el profesor Kalergis está liderando el desarrollo y un estudio clínico de una vacuna contra uno de los patógenos más importantes en la salud pública, el Virus Respiratorio Sincicial, el cual afecta principalmente a los recién nacidos colapsando las salas de urgencias en los meses de invierno.

Contacto: akalergis@bio.puc.cl

Roberto S. Gómez

Roberto S. Gómez

Encargado Principal

Licenciado en Ciencias Biológicas de la Pontificia Universidad Católica de Chile y actualmente es estudiante de doctorado en la misma casa de estudios. Roberto, se ha encargado de la unidad de citometría del Dr. Kalergis desde el año 2010 a la fecha, teniendo entrenamiento por el encargado anterior, Dr. Leandro Carreño, donde aprendió el uso y manejo de los equipos FACSCalibur, FACSCantoII y FACSAria II. Además durante una estadía en Francia, Roberto fue entrenado en el manejo del equipo LSRII. Durante el año 2014, participó en la capacitación del equipo LSR Fortessa X20 y el uso del software FACSDIVA 8 dictados por Beckton Dickinson. Roberto es el actual encargado del servicio de citometría.

Contacto: citometria@bio.puc.cl, rsgomezj@gmail.com

Teléfono: +56 2 23541924

Perfil Research Gate

Natalia Muñoz Durango

Natalia Muñoz Durango

Encargado Alterno

Microbióloga y Bioanalista de la Universidad de Antioquia, Colombia y Magister en Ciencias Básicas Biomédicas de la misma casa de estudios. Actualmente Natalia está cursando el doctorado en la facultad de Ciencias Biológicas de la Pontificia Universidad Católica de Chile. Natalia tiene una vasta experiencia en el manejo de los equipos de citometría asistiendo a varios cursos, dentro de ellos Entrenamiento y Asistencia al II Congreso Internacional de Aplicaciones en Citometría de Flujo, Becton Dickinson Bioscience. Medellín, Colombia, entre 6 – 8 de Julio de 2006. Curso Teórico-Práctico de Tópicos en Citometría de Flujo. Unidad de Citometría de Flujo, Universidad de Antioquia. Medellín, Colombia, entre 3 – 10 de Febrero 2011. Entrenamiento de Usuario BD FACSAria II. Becton Dickinson Bioscience. Santiago de Chile, Chile, entre 17-21 de Noviembre de 2014. Entrenamiento en el manejo del equipo BD LSRFortessa X-20 y el software FACSDiva para la realización de Citometrías de Flujo de hasta 18 colores. Becton Dickinson Bioscience. Santiago de Chile, Chile, entre 17-21 de Noviembre de 2014.

Contacto: natydurango@gmail.com

Teléfono: +56 2 23541924

Perfil Research Gate

 

Evelyn Jara Fernández

Evelyn Jara Fernández

Encargado Alterno

Bioquímico de la Universidad Austral de Chile en Valdivia y Dra. En Ciencias m/Biología Celular y Molecular de la misma casa de estudio. Actualmente es Investigadora Postdoctoral Fondecyt del Laboratorio de Inmunología Molecular Biomédica y Patogenicidad Microbiana. La Dra. Jara posee experiencia en el uso de equipos de citometría de flujo y ha realizado capacitaciones para su manejo, entre las cuales se cuentan: 1) entrenamiento en el uso del equipo FACSCanto II y manejo de software (Beckton Dickinson Bioscience. Octubre 2008. Valdivia. Chile); 2) entrenamiento en el manejo del equipo BD LSRFortessa X-20 y el software FACSDiva para la realización de citometría de flujo (Becton Dickinson Bioscience. 17-21 de Noviembre de 2014. Santiago. Chile).

Contacto: jaraevelyn@gmail.com

Teléfono: +56 2 23541924

 

Citometría de Flujo

El servicio existe desde el año 2005 y está enfocado a poder ayudar a los diferentes investigadores a solucionar sus inquietudes a través de la técnica de citometría de flujo.

El Servicio de citometría de flujo de la facultad de Ciencias Biológicas de la Pontificia Universidad Católica nace bajo la necesidad de diferentes laboratorios dentro de la Universidad por analizar muestras a través de la técnica de citometría de flujo, la cual permite el análisis de múltiples parámetros en una población celular, siendo capaz de diferenciar desde tipos celulares distintos hasta diferencias en expresión de proteínas específicas en dichas células. Con el avance en la ciencia la citometría de flujo se ha diversificado y no solo es capaz de detectar diferentes marcadores a través de anticuerpos, sino que sondas fluorescentes también pueden ser utilizadas y así poder medir por ejemplo el estado oxidativo de una célula. Además, el servicio cuenta también con la posibilidad de separar diferentes poblaciones celulares según parámetros específicos determinados por el investigador, lo que permite que se puedan purificar poblaciones que expresan o no una proteína o tienen diferentes características particulares que puedan ser medidas a través de citometría de flujo.

El servicio cuenta con tres citómetros de flujo un FACSCalibur, el cual cuenta con capacidad de análisis de 4 parámetros simultáneos, un FACSCanto II, el cual cuenta con la capacidad de análisis de 6 parámetros simultáneos y un LSR Fortessa X20, el cual cuenta con la capacidad de análisis de 16 parámetros simultáneos. Y además cuenta con un cell sorter, un FACSAria II, el cual cuenta con la capacidad de análisis de 9 parámetros y separación simultánea de 4 poblaciones.

Esta es una página de ejemplo. Es diferente a una entrada del blog, ya que se quedará en un lugar y se mostrará en la navegación del sitio (en la mayoría de temas). La mayoría de personas empieza con una página “Acerca de” que brinda información a los visitantes. Se podría decir algo como esto:

¡Hola! Durante el día soy un mensajero, un aspirante a actor por la noche, y este es mi blog. Vivo en Lima, tengo un enorme perro llamado Pocho, y me gusta el Pisco Sour. (Y caminar bajo la lluvia.)

…o algo como esto:

La compañía XYZ, se fundó en 1971, y ha estado desde entonces, proporcionando artilugios de calidad al público. Está situada en la ciudad de Concepción, Chile y emplea a más de 2,000 personas. Hace todo tipo de cosas sorprendentes para la comunidad penquista.

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